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    5301星形細(xì)胞培養(yǎng)基的使用規(guī)范

    更新時間:2025-06-23      點擊次數(shù):271
      5301星形細(xì)胞培養(yǎng)基是一種專門用于星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)的無菌、液體培養(yǎng)基,通常包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胎牛血清、生長因子、抗生素等成分。
      5301星形細(xì)胞培養(yǎng)基使用規(guī)范:
      1.細(xì)胞接種
      細(xì)胞密度:星形細(xì)胞接種密度根據(jù)細(xì)胞代次和狀態(tài)調(diào)整。
      預(yù)處理:接種前用培養(yǎng)基預(yù)潤培養(yǎng)瓶/皿,避免細(xì)胞干燥損傷。
      2.培養(yǎng)條件
      溫度:37℃恒溫培養(yǎng)。
      氣體環(huán)境:5%CO2(維持pH穩(wěn)定),部分星形細(xì)胞可能需要低氧條件。
      換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基,避免代謝產(chǎn)物積累導(dǎo)致細(xì)胞毒性。
      3.傳代與凍存
      消化方法:用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液輕柔消化,血清終止消化。
      凍存:使用含10%DMSO的凍存培養(yǎng)基,程序降溫后轉(zhuǎn)入-80℃或液氮保存。
      5301星形細(xì)胞培養(yǎng)基注意事項:
      1.避免污染
      操作前紫外線消毒超凈工作臺30分鐘,佩戴手套和口罩。
      開封的培養(yǎng)基需在1個月內(nèi)用完,避免反復(fù)凍融(可分裝為單次用量)。
      2.血清質(zhì)量控制
      胎牛血清需經(jīng)過檢測(如支原體、病毒、內(nèi)毒素),熱滅活可滅活補(bǔ)體成分。
      不同批次血清可能影響細(xì)胞狀態(tài),建議批量采購并測試。
      3.生長因子保存
      bFGF/EGF需分裝為小劑量,-20℃保存,避免反復(fù)凍融失效。
      4.特殊需求調(diào)整
      原代細(xì)胞培養(yǎng):可能需要添加更高濃度血清或基質(zhì)包被。
      分化誘導(dǎo):去除生長因子并添加低血清可誘導(dǎo)星形細(xì)胞分化。

     

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